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    柱前衍生HPLC法测定保山透心绿蚕豆中氨基酸的含量

    时间:2020-03-26 05:22:52 来源:千叶帆 本文已影响

    建立了柱前衍生高效液相色谱法同时测定保山透心绿蚕豆中16种氨基酸的方法。方法以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,采用Diamonsil AAA氨基酸分析柱用二元梯度洗脱,于UV254 nm 波长下检测,60min 内16种氨基酸得到良好的分离。氨基酸浓度在0.1~0.5 umol/mL范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系,相关系数均大于0.9997,样品的相对标准偏差在1.36%~5.43%之间,检出限为0.05umol/mL。相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言,该方法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,可用于保山透心绿蚕豆及其他豆类中氨基酸的分析测定。

    保山透心绿蚕豆属蚕豆中的稀有名贵品种,特产于云南保山,特殊的地理气候使其维生素、营养物质含量均比普通蚕豆高[1],是高蛋白、富淀粉、低脂肪的豆类作物,含有人体必须的8种氨基酸、维生素和矿物质,被誉为云南高原特种绿蚕豆。氨基酸作为评价营养质量的一项重要指标,研究保山透心绿蚕豆中的氨基酸组成及其含量,对研究其营养价值和质量控制具有十分重要的意义。

    测定氨基酸的方法很多[2-5] ,如氨基酸分析仪柱后衍生测定,但是氨基酸分析仪价格昂贵,分析时间长,且只能用于分析氨基酸,限制了氨基酸分析技术的广泛使用。七十年代以来,柱前衍生高效液相色谱法开始应用于氨基酸的测定[6],特别是异硫氰酸苯酯( PITC)柱前衍生法由于其产物苯基硫酸盐较稳定,该法是目前氨基酸分析中具有吸引力的分析方法之一。

    本文以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生剂,结合紫外检测器定量检测保山透心绿蚕豆中16种氨基酸含量。该方法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,可用于保山透心绿蚕豆及其他豆类中氨基酸的分析测定。

    1实验部分

    本研究建立了异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法同时测定保山透心绿蚕豆中16种氨基酸的方法,该方法快速、灵敏、准确,可用于豆类中氨基酸的分析。同时,测定结果表明保山透心绿蚕豆氨基酸总含量为30.3%,处于蚕豆中含量的上端[7-8],由此可见,保山透心绿蚕豆蛋白质含量较高,具有较高的营养价值,是值得推广的地方特色产品。

    (作者单位:云南省保山市质量技术监督综合检测中心)

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